普罗布诺(重庆)生物科技有限公司
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一、类器官
类器官(Organoids)是近年突破发展的一种体外3D组织培养技术,可以在体外高成功率、快速的培养人的组织细胞,形成保留原器官组织结构和生物信息的“微组织”,在个性化治疗和再生医学领域有广泛的应用前景。肿瘤类器官培养技术,通过在体外建立类似体内的微环境,把患者肿瘤组织分离的肿瘤细胞在体外实现3D培养,形成微型肿瘤模型。利用该模型帮助肿瘤患者个性化的测试多种临床及临床前期药物的敏感性,实现个性化的精准医疗。通过类器官库药物检测发现平台,实现肿瘤药物化合物的提取。
目前,已建成的类器官包括脑、乳腺、肺、肝、胰腺、胃、肠、前列腺等。无论是正常脏器抑或是肿瘤,只要存在成体干细胞(或肿瘤干细胞),均有被培养成类器官的潜力。其中,肿瘤及其相关的类器官已经被广泛地被应用于肿瘤的发病与进展机制研究、个体化医学与新药研发中。正常类器官的应用领域主要集中在发育生物学、疾病的发生于发展、微生物-宿主相互作用、药物的药效与毒理等。随着各种类器官模型的培养方法以及鉴定体系的成熟,以及基于类器官的实验方法的日渐丰富,类器官模型在科研中的地位也在不断提高,现已成为最重要的体外模型之一。
普罗布诺已经成功研发了包括肺癌、乳腺癌、胃癌、结肠癌和食管癌等中国高发肿瘤类型的个性化医疗服务产品。针对每一种肿瘤的疾病发展进程和治疗方案,设计了服务于新辅助化疗和术后辅助化疗的服务方案。
从患者手术或者活检中获取肿瘤组织标本,进行肿瘤类型特异性的类器官培养,快速实现组织培养和扩增,然后开展临床常用药物和药物组合的药物敏感性测试,在最短的时间内,为患者提供敏感药物的遴选服务。
五种中国高发肿瘤类器官细胞培养后倒置显微镜下明场照片:
                  结肠癌类器官照片                              肺癌类器官照片                                 胃癌类器官照片                            乳腺癌类器官照片                             食管癌类器官照片  
二、类器官模型与原肿瘤组织对比
人源肿瘤类器官(PDO)模型和对应组织具有同样的STR图谱,并且具有丰富的个体多样性,证明建立的PDO模型来源于特定的患者组织。​
X: organoids derived from patients​
类器官模型可以保留一定的肿瘤组织病理信息。体外3D培养的类器官中的肿瘤细胞,形成紧实的带腔球形结构,H&E 染色显示,类器官模型形成的上皮样结构和原发肿瘤的组织形态高度一致。在肿瘤发生过程中,部分患者会获得致癌基因突变,这些突变只存在于肿瘤细胞而正常细胞没有,例如肺癌EGFRL858R突变。通过AMRS PCR技术检测EGFRL858R突变,分别检测肺癌组织和从其建立的类器官中抽提的基因组DNA,发现从肺癌肿瘤组织和类器官模型,均可以检测到对应的EGFRL858R突变。从分子标志物水平,证明了细胞模型和肿瘤组织的一致性。
类器官与其对应的肿瘤组织组织结构非常类似:HE染色图片显示类器官很好的保留了肿瘤上皮样组织结构,且类器官细胞的ER/PR/HER2 指标与原肿瘤组织相应的指标非常一致。
肿瘤类器官的遗传突变图谱与原肿瘤组织保持高度一致(吻合度高达96%)